潔凈廠房的沉降菌標(biāo)準(zhǔn)原理:采用沉降法,即通過于培養(yǎng)皿中利用自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子,經(jīng)不少于48小時(shí)的培養(yǎng),在30—35℃下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù),以菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù),并以此來評(píng)定潔凈室(區(qū))的潔凈度。
潔凈廠房沉降菌標(biāo)準(zhǔn)主體內(nèi)容:
1. 器材:
高壓消毒鍋:使用時(shí)嚴(yán)格按照說明書操作。
恒溫培養(yǎng)箱:必須定期對(duì)培養(yǎng)箱的溫度計(jì)進(jìn)行檢定。
培養(yǎng)皿:Φ90mm玻璃培養(yǎng)皿
培養(yǎng)基:營養(yǎng)瓊脂
2. 操作程序
2.1 采樣
將已制備好的培養(yǎng)平皿按要求放置,打開培養(yǎng)皿蓋,使培養(yǎng)基表面暴露0.5小時(shí),再將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置。
2.2 培養(yǎng):
2.2.1 全部采樣結(jié)束后,將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.2.2 在30~35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),時(shí)間不少于48小時(shí)。
2.2.3 每批培養(yǎng)基應(yīng)有對(duì)照實(shí)驗(yàn),檢驗(yàn)培養(yǎng)基本身是否污染??擅颗x定3只培養(yǎng)皿做對(duì)照實(shí)驗(yàn)。
2.3 菌落記數(shù)
2.3.1用肉眼直接計(jì)數(shù),標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì),然后用5~10倍放大鏡檢查,是否有遺漏。
2.3.2 若培養(yǎng)皿上有2個(gè)或2個(gè)以上的菌落重疊,可分辨時(shí)仍以2個(gè)或2個(gè)以上菌落計(jì)數(shù)。
2.4 注意事項(xiàng)
2.4.1 測(cè)試用具要做滅菌處理,以確保測(cè)試的可靠性、正確性。
2.4.2 采取一切措施防止人為對(duì)樣本的污染。
2.4.3 對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)做詳細(xì)的記錄。
2.4.4 由于細(xì)菌種類繁多,差別甚大,計(jì)數(shù)時(shí)一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)觀察,不要漏計(jì)培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落,須注意細(xì)菌菌落與培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別,必要時(shí)用顯微鏡鑒別。
2.4.5 采樣前應(yīng)仔細(xì)檢查每個(gè)培養(yǎng)皿的質(zhì)量,如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)、破損或污染的應(yīng)剔除。
3. 測(cè)試規(guī)則
3.1 測(cè)試狀態(tài)
3.1.1 沉降菌測(cè)試前,被測(cè)試潔凈室(區(qū))的溫濕度須達(dá)到規(guī)定的要求,靜壓差、換氣次數(shù)、空氣流速必須控制在規(guī)定值內(nèi)。
3.1.2 沉降菌測(cè)試前,被測(cè)試潔凈室(區(qū))已經(jīng)過消毒。
4.1.3 測(cè)試狀態(tài)有靜態(tài)和動(dòng)態(tài)兩種,測(cè)試狀態(tài)的選擇必須符合生產(chǎn)要求,并在報(bào)告中注明測(cè)試狀態(tài)。
3.2 測(cè)試人員
3.2.1 測(cè)試人員必須穿戴符合環(huán)境潔凈級(jí)別的工作服。
3.2.2 靜態(tài)測(cè)試時(shí),室內(nèi)測(cè)試人員不得多于二人。
3.3 測(cè)試時(shí)間
3.3.1 對(duì)單向流,如100級(jí)凈化房間及層流工作臺(tái),測(cè)試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于10分鐘后開始。
3.3.2 對(duì)非單向流,如10,000級(jí),100,000級(jí)以上的凈化房間,測(cè)試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于30分鐘后開始。
3.4 沉降菌計(jì)數(shù)
3.4.1 采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置
潔凈廠房沉降菌測(cè)試的最少采樣點(diǎn)數(shù)目可查表1確定。在滿足最少測(cè)點(diǎn)數(shù)的同時(shí),還宜滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)。
3.5.2 采樣點(diǎn)的位置
3.5.2.1工作區(qū)采樣點(diǎn)的位置離地0.8~1.5m左右(略高于工作面)。
3.5.2.2 可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處增加采樣點(diǎn)。
3.6 記錄:測(cè)試報(bào)告中應(yīng)記錄房間溫度、相對(duì)濕度及測(cè)試狀態(tài)。
3.7 結(jié)果計(jì)算
3.7.1 用計(jì)數(shù)方法得出各個(gè)培養(yǎng)皿的菌落數(shù).
3.7.2平均菌落數(shù)的計(jì)算:
平均菌落數(shù)=(M1+M2+…Mn)/n
式中: M1 — 1號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)
M2 — 2號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)
Mn — n號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)
n — 培養(yǎng)皿總數(shù)。
3.8 結(jié)果判定
潔凈廠房的沉降菌標(biāo)準(zhǔn)用平均菌落數(shù)判斷潔凈室(區(qū))空氣中的微生物數(shù)。
3.8.1潔凈室(區(qū))內(nèi)的平均菌落數(shù)必須低于所選定的評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)。
3.8.2若某潔凈室(區(qū))內(nèi)的平均菌落數(shù)超過評(píng)定標(biāo)準(zhǔn),則必須對(duì)此區(qū)域先進(jìn)行消毒,然后重新采樣兩次,測(cè)試結(jié)果均需合格。
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